制备液相色谱柱正确使用方法（附万立演示视频）

“色谱柱”各位实验员们应该经常和它打交道吧,作为制备液相色谱实验的“心脏”,其初始状态直接决定分离精度与使用寿命,本期,我们就带大家拆解新柱试用的全流程,文中附上万立仪器实操演示,新手也能一次搞定!

一、色谱柱试用前,请务必做好以下准备:

1、检查色谱柱外观:观察柱体是否有磕碰变形,两端接口螺纹是否完好,若有包装破损,立即联系厂商更换。

2、查看标签:重点记录3个关键参数 —— 耐受压力、pH耐受范围、尺寸。

3、冲洗仪器:在安装之前,先冲洗仪器管路,要保证系统管路中是没有杂质的状态,无缓冲盐等,防止污染新的色谱柱。

4、检查系统连接:确保所有管路接头紧密,无泄漏。

5、流动相与样品准备:

①尽量使用流动相溶解样品。

②使用色谱纯试剂和超纯水,并经过0.45 ?m或更小孔径滤膜过滤和脱气。

二、主要步骤:冲洗和平衡(含视频演示)

新柱出厂时残留的生产溶剂等杂质,可能会导致基线噪声和鬼峰。必须通过冲洗去除杂质,再用流动相平衡固定相,这步是试用成功的关键。

1、活化与平衡

①可以先用100%的甲醇或者乙腈冲洗,选择小流速(20ml/min),冲洗10-20倍柱体积;

②再用甲醇:水或者乙腈:水(1:1),冲洗10倍柱体积。

2、起始流动相平衡

冲洗后用起始流动相平衡柱体,使固定相与流动相达到分配平衡,若流动相含缓冲盐,先以5%有机相-水相冲洗10倍柱体积,再切换至目标比例,避免盐在柱内析出。

为了更直观地展示以上流程,我们特别录制了一段在万立制备液相色谱系统上的实操视频片段,具体操作可参考视频演示哦!

您的浏览器不支持video 标签。

三、试用结束后的保存

实验完成后,必须对色谱柱进行正确冲洗和保存,以备下次使用。还是以反相色谱柱为例:

1、采用甲醇:水或者乙腈:水(8:2),让这个比例的有机溶剂填满色谱柱。

2、将色谱柱两端用堵头密封好,并贴上标签,注明保存介质和日期,置于干燥处存放。

小贴士:保存教学我们也有具体操作视频哦!

您的浏览器不支持video标签。

结语:正确试用色谱柱,是保证制备纯化结果可靠性、延长色谱柱使用寿命的关键第一步。遵循“准备-平衡-测试-保存”的科学流程,并采用像万立仪器这样稳定可靠的设备和直观的软件,让每一次制备实验都更加高效和安心。希望本篇内容对您有所帮助!如有任何疑问,欢迎在评论区留言讨论。

声明:部分内容来源于网络、《液相色谱实战宝典》,本篇文章只是用于科普,不作任何商业用途,如涉及内容或其他问题,请联系我们。

本文所述为通用性操作规程,具体步骤请务必以您所使用的色谱柱说明书和实验室SOP为准。视频演示供参考。